用免疫测定法分析HbA1c
一种典型的方法是对葡萄糖和β-链的前5-10个氨基酸使用特异性抗体(通常是单克隆抗体)。这种抗体是乳胶涂层的。还有一种凝集剂,它是一种合成聚合物,具有抗体靶向的HbA1c部分的多个拷贝。凝集剂与抗体反应产生光散射和吸光度增加。
来自血液样品的HbA1c然后与凝集剂竞争抗体胶乳结合位点,并因此减少光的散射和吸光度。所以血液中的HbA1c越大,散射光的吸光度越小。由此计算HbA1c的量,并且总血红蛋白可以通过在血红蛋白的Soret吸收带处或附近(410-420nm)测量或通过在约540nm处通过Drabkins方法(氧化和转化为氰化血红蛋白)来测定,或者使用碱性血红素试验。
使用免疫测定程序的测定平台包括:Siemens Healthcare Diagnostics DCA 2000和Advia 1650,Dimension,Roche Cobas和Hitachi以及Beckman分析仪。大多数对衰老或其他化学或自由基类型反应产生的血红蛋白反应不会发生在HbA1c位点,而该方法组中的抗体所针对的位置是HbA1c位点。由于这个原因,这种类型的方法通常更容忍老化/降解反应,预计HbA1c对照比离子交换HPLC程序具有更长的可用重构或开放瓶时间。